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灭菌消毒方法

在医学中微生物的杀灭叫灭菌;灭菌的结果是无菌,也就是说指定样品经过一系列处理后不含任何微生物。例如手术器械的消毒过程等。
微生物的灭菌如果用加热方法与温度有关外还和作用时间有关。
100度温度下加热30分左右时候基本上大部分微生物会被杀灭,但是细菌的芽孢却例外,能耐高温。
在医学实践中,常采用物理、化学及生物的方法,清除环境中的微生物,以切断传播途径,保护易感人群,从而控制或消灭传染病。现将有关术语介绍如下:

消毒 (disinfection) 杀灭物体上病原微生物的方法,称为消毒。用于消毒的化学药品称消毒剂。常用浓度下的消毒剂,只对细菌繁殖体有效,对其芽胞则需提高消毒剂浓度和延长作用时间才能杀灭。

灭菌 (sterilization) 杀灭物体上所有微生物,包括细菌芽胞的方法,称灭菌。

无菌 (asepsis) 物体中无活的微生物存在,称为无菌。防止微生物进入机体或物体的方法,称为无菌操作或无菌技术。进行微生物学实验、外科手术、换药、注射时,均需严格遵守无菌操作规定。

防腐 (antisepsis) 防止或抑制微生物在物体中生长繁殖的方法,称防腐。用于防腐的化学药品称防腐剂。使用同一种化学药品低浓度时为防腐剂,高浓度则为消毒剂。

卫生清理 (sanitation) 将微生物污染了的无生命物体表面还原为安全水平的处理过程。例如医院内的病房、病人使用过的用具、布类的卫生处理等。

一、物理消毒灭菌法

物理消毒灭菌法是医学实践中常用的方法,通常包括热力、紫外线、辐射、超声波和滤过除菌等。

(一)热力灭菌法

热力能破坏微生物的蛋白质和核酸,使蛋白质变性凝固,核酸解链崩裂,从而导致其死亡。

1.干热灭菌法 常用焚烧、烧灼和干烤等方法。

(1)焚烧与烧灼 焚烧仅用于废弃的被病原微生物污染的物品、垃圾、人及动物尸体等。烧灼用于微生物实验室的接种环、金属器械、试管口、瓶口等的灭菌。

(2)干烤 使用干烤箱灭菌,一般需加热至160℃~170℃经2h,可达到灭菌的目的。适用于玻璃器皿、瓷器、金属物品等的灭菌。

2.湿热消毒灭菌法

(1)巴氏消毒法 法国学者巴斯德创用而得名。主要以较低温度杀灭病原菌或特定微生物,而使物品中不耐热成分不被破坏。此法有两种:一种方法是加热61.1℃~62.8℃、30min;另一种方法是加热71.7℃、15~30s。现在人们多用后种方法对牛奶进行消毒。

(2)煮沸法 煮沸100℃、5~10min,可杀死细菌繁殖体。芽胞则需要煮沸1~2h。常用于注射器、食具与饮水的消毒。

(3)流通蒸气法 用阿诺(Arnold)蒸锅或普通蒸笼,加热100℃、15~30min,可杀灭细菌的繁殖体。若将消毒后的物品放入37℃孵箱培养,使芽胞发育成繁殖体,次日再蒸一次,如此连续三次以上,可达到灭菌效果,这种方法称为间歇灭菌法。常用于不耐高温的物品,如糖类、血清和鸡蛋培养基等的灭菌。

(4)高压蒸气灭菌法 是一种迅速而有效的灭菌方法。使用高压蒸气灭菌器,利用加热产生蒸气,随着蒸气压力不断增加,温度随之升高,通常压力在103.4kPa(相当旧制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )时,器内温度可达121.3℃,维持15~30min,可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。此法常用于一般培养基、生理盐水、手术器械及敷料等耐湿和耐高温物品的灭菌。

(二)紫外线与电离辐射

1.日光与紫外线 日光消毒是最简单、经济的方法,将病人的被褥、衣服、书报等在日光下曝晒数小时,可杀死表面的大部分微生物。日光中杀菌的成份主要是紫外线。紫外线200~300nm时,具有杀菌作用,其中以265~266nm波长的紫外线杀菌力最强。紫外线的杀菌原理,主要是细菌DNA吸收紫外线后,一条链上相邻的两个嘧啶通过共价键结合形成二聚体,从而干扰了DNA的正常碱基配对,导致细菌死亡或变异。

紫红外线能透过石英,但不能穿过一般玻璃或薄纸,因此,紫外线只适用于物体表面及空气的消毒。例如手术室、婴儿室、传染病房、无菌制剂室、微生物接种室的空气消毒。

2.电离辐射 X射线、γ射线和阴极射线等电离辐射,有较高的能量与穿透力,因而可产生较强的致死效应。其机制在于产生游离基,破坏DNA。此法常用于大量一次性医用塑料制品的消毒;亦可用于中药成药和食品的消毒,而不破坏其化学成分和营养成分。

(三)超声波

超声波是不被人耳感受的高于 20千周/s的声波。其杀菌机制主要是它通过水时发生空化作用,而破坏了细菌细胞质的胶体状体,使其胞膜、胞质分离,胞壁及胞膜破碎致细菌繁殖体死亡。此法主要用于粉碎细胞,以提取细胞组分或制备抗原等。

(四)微波

是一种波长为 1mm到1m左右的电磁波,称微波。它能穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质,但不能穿透金属表面。目前用于消毒的微波有2,450MHz与915MHz两种,常用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品用具及其它用品的消毒。

(五)滤过除菌

滤过除菌是用滤菌器阻留过滤液体和气体的细菌,以达到无菌的目的。滤菌器含有微细小孔,只允许液体或气体通过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。常用滤菌器有蔡氏滤器、玻璃滤器、薄膜滤器及高效颗粒空气滤器四种。主要用于不耐热的血清、抗毒素、生物药品以及空气等的除菌。

二、化学消毒法

许多化学药物都有抑制或杀灭微生物作用,按作用不同分为化学消毒剂和化学治疗剂两类,用于消毒、防腐和治疗疾病。

(一)常用消毒剂的种类和应用

具有杀死微生物的化学药物称消毒剂。消毒剂对人体有毒性作用,只能外用,不能内服。主要用于皮肤粘膜的伤口、器械、排泄物和周围环境的消毒。消毒剂在低浓度时也可作防腐用,但防腐剂的关键是应要对人体无毒性作用。消毒剂种类浓度与用途见表 13-1。

表 13-1 常用消毒剂的种类浓度与用途

类别
名称
浓度
用途

重金属盐类
红汞
2%
皮肤粘膜的小创伤消毒

升汞
0.05%~0.1%
非金属器皿浸泡消毒

硝酸银
1%
新生儿滴眼防淋球菌感染

氧化剂
高锰酸钾
0.1%
皮肤粘膜消毒

过氧化氢
3%
皮肤粘膜创口消毒

过氧乙酸
0.2%~0.5%
塑料、玻璃器材消毒

碘酒
2.0%~2.5%
皮肤消毒


0.2ppm~0.5ppm
饮水及游泳池消毒

漂白粉
10%~20%
地面、厕所与排泄物消毒

醇类
乙醇
70%~75%
皮肤、体温表消毒

酚类
石碳酸
3%~5%
地面、器具表面的消毒

来苏
2%
皮肤消毒

醛类
甲醛
10%
物品表面、空气消毒

戊二醛
2%
精密仪器、内窥镜消毒

表面活性剂
新洁尔灭
0.05%~0.1%
皮肤粘膜、器械消毒

杜灭芬
0.05%~0.1%
皮肤创伤冲洗、金属器械、塑料、橡皮类消毒

染料
龙胆紫
2%~4%
浅表创伤消毒

酸碱类
醋酸
500mml/100m 3

加等量水蒸发
空气消毒

食醋
2%溶液,

3~5ml/m 3
熏蒸消毒空气

生石灰
加水 1:4

或 1:8

配成糊状
排泄物及地面消毒


(二)常用消毒剂的杀菌机制

消毒剂杀菌原理一般有以下三方面:

1.使菌体蛋白质变性或凝固 例如醇类、醛类、酸碱类以及高浓度的重金属盐和酚类。

2.干扰细菌的酶代谢系统 例如低浓度重金属盐、氧化剂与细菌胞浆中某些酶的-SH基结合,使酶活性丧失。

3.损伤细菌细胞膜 例如表面活性剂、脂溶剂、低浓度酚类等。

(三)影响消毒灭菌效果的因素

消毒灭菌效果受微生物种类、消毒剂及环境等多种因素影响。

1.消毒剂的性质、浓度与作用时间 同一种消毒剂的浓度愈高,作用时间愈长,杀菌效果愈好。但乙醇以70%左右的消毒效果最好。其原因是更高浓度的乙醇使菌体表面蛋白迅速脱水凝固,影响乙醇渗入菌体内。

2.细菌种类 同一消毒剂对不同细菌的杀菌效果不一样,是因为不同细菌对消毒剂抵抗力不同。细菌的幼龄菌对消毒剂比较敏感。

3.有机物及其他因素 细菌常混合在血清、脓、痰、排泄物中,这些物质中的有机物可阻碍消毒剂与细菌的接触,并消耗药品,因而减弱消毒效果。

消毒剂在消毒灭菌过程中的温度、湿度、酸碱度、穿透力、表面张力等因素,都对消毒灭菌的效果有一定影响。

三、生物因素对细菌的影响

在自然界中,细菌与细菌之间,细菌与动植物之间存在着共生和拮抗的关系。我们可以利用生物之间的拮抗作用,使用某些细菌的代谢产物、植物成分等抑制或杀灭病原性细菌,以防治传染病。

(一)抗生素(antibiotie)

抗生素是由放线菌、真菌或细菌等微生物在代谢过程中产生,并能抑制或杀灭其他微生物的有机化合物。

抗生素的种类很多,有些已能人工合成,其抗菌机制主要有以下几种:

1.抑制细胞壁的合成,如青霉素、头孢霉素、杆菌肽等。

2.增加细胞膜的通透性,抑制细胞膜的运输功能,如制霉菌素、多粘菌素等。

3.抑制细菌蛋白质的合成,如氯霉素、四环素、庆大霉素、卡那霉素等。

4.抑制细菌核酸的合成,如新生霉素、争光霉素等。

抗生素在临床上广泛的应用,在治疗传染病上起到了积极作用,但病原菌的耐药菌株日益增多。从患者标本中分离细菌作药物敏感试验,以选用对致病菌敏感的抗生素治疗,是减少耐药菌株和提高抗生素疗效的有效措施之一。

(二)噬菌体(bacteriophage)

噬菌体是寄生于细菌的病毒,具有一定的形态结构和严格的寄生性,需在活的易感细胞内增殖,并常将细菌裂解。

(三)中草药

临床实践和实验研究都证明有很多中草药有抑菌、杀菌作用,如黄连、黄柏、黄芩、连翘、金银花等,其不仅对多种细菌有抗菌作用,而且对某些抗生素耐药菌株也有抗菌效果。

posted on 2008-06-20 12:51 肥仔 阅读(461) 评论(0)  编辑 收藏 引用 所属分类: 生活——常识


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